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为什么要用不同的限制酶切割
...那
为什么
在剪切目的基因的时候同种序列
要用不同
种的内切酶
答:
用不同限制酶切割的目的是:保证目的基因和质粒(运载体)的准确连接
,避免无效连接(如:目的基因—目的基因连接物、质粒自身环化等)过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理:虽然一种限制酶
只能识别一种特定的氨基酸序列
,但两种限制酶识别的序列可以相包含,例:酶A识别GGATCC序列,酶B识别GATC序列...
为什么
可以
用不同的限制酶
来切目的基因和载体?例如用EcoR 1和Alu 1切...
答:
而采用不同限制酶的原因是:载体上可用到的位点较少
,确定载体需要的位点之后,再观察目的基因,但是载体上可用的酶可能在目的基因内部有酶切位点,例如你举得例子,在目的基因内部具有SmaI的位点,因此不能用这个酶,这时我们可以寻找SmaI的同尾酶,这样就可以进行特异性的酶切与连接了,在例子中举例的Sm...
在构建基因表达载体时,常用两种
不同的限制酶切割
目的基因和质粒,获得不...
答:
(1)用限制酶切割DNA后,可能产生黏性末端,也可能产生平口末端.若要在限制酶基因工程中
,往往采用同种限制酶切割目的基因和质粒以产生相同的黏性末端,再用DNA连接酶使其直接进行连接.(2)RNA聚合酶识别和结合的部位是启动子.将目的基因导 ...
为什么用
两种
不同的限制酶切
目的基因和运载体,就能防
答:
两种不同的限制性内切酶识别并切割的序列是不同的
,也就是两种酶分别切割了基因和载体时,产生了两个切口,这两个切口不是粘性末端,不能互补配对,所以不可能连接在一起,如果用一种酶来切那么这样基因中或者是载体上就会有相同的粘性末端,这样基因本身除了切下来的那段之外,剩下的部分在连接酶作用下相同的...
运载体要具备的条件 有多个
限制酶
切点,而且每种酶的切点最好只有一个...
答:
有多个
限制酶切
点是说能与多种限制酶反应,但每种酶切点只有一个是位置与特定
的限制酶
反应,这样使的质粒基因不会丢失,且对质粒上其他的基因功能减少影响。当有两个以上的切点时,容易将质粒切成几段,对于其他基因片段完整性可能有一定影响。
为什么
有题目上说用两种
不同限制
性核酸内切
酶切
好
答:
对的呀、 用两种不同
限制
性核酸内切酶 就意味着 切的是 两个不同的 碱基序列、 如果用一种 就会造成 自身的环节、也就是 自己刚切完 就又自己连上…… 所以 最好用 两种
不同的酶
。
为什么不同的限制酶切割
基因 就可以避免自身与自身连接呢>?
答:
不同的限制酶切割
后产生的末端一般不同,而DNA分子要连接时,必须要求两个末端是相同的情况下才能连接。因此,不同的限制酶切割基因可以避免自连。
为什么
基因工程中运载体要具有多个
限制酶
切点
答:
做为具有
使用
性的载体做为具有使用性的载体,一般最少有2个以上
不同的限制
性
酶切
位点,这样能够保证需要插入片段的效率和插入的片段插入的方向性。如果只有一个酶切位点,那在做连接反应时候载体自连现象会非常严重,同时插入片段有可能
以
2种相反方向插入载体,这样连接成功后还需要筛选方向正确的连接体...
构建重组载体时用两种
限制酶切割
目的基因的原因
答:
(3)用SalI和HindIII两种
限制酶
对质粒进行
切割
时,会破会四环素抗性基因,但不会破坏氨苄青霉素抗性基因,因此导入重组质粒的农杆菌能在含有氨苄青霉素的培养基上能生存,但不能在含有四环素培养基上生存,所以培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素,含目的基因的是4和6菌落中的细菌.探针是指用...
基因工程里,用两种
不同的限制酶
一起
切割
质粒和含目的基因的DNA,可以防止...
答:
取下一段目的基因要切两次,也就是说这里切的两次可以分两种
不同的酶
来切,同样的,载体也
需要切
两次同样也是用这两种酶来切,这样有两组碱基的互补配对,就可以避免载体和载体配对以及目的基因和目的基因配对。(不太确定啊。。。)
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