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举例说明常用的报告基因
植物基因工程中
常用的报告基因
有哪些
答:
在植物基因工程研究领域,已使用的报告基因有以下几种:
胭脂碱合成酶基因(nos)、章鱼碱合成酶基因(ocs)、新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)、氯霉素乙酰转移酶基因
(cat)、庆大霉素转移酶基因、葡萄糖苷酶基因、荧光酶基因等。nos、ocs这两个基因是致瘤土壤农杆菌(Agrobacterium tumfaciens)的Ti质粒特...
报告基因列举
几种
常见的报告基因
答:
β半乳糖苷酶是另一种常用报告基因
,编码于大肠杆菌的lacZ基因,其易于通过免疫组织化学观察。使用ONPG或CPRG底物检测其酶活性,ONPG灵敏度较低,而CPRG更高。
荧光素酶
,如细菌荧光素酶、萤火虫荧光素酶和Renilla荧光素酶,因其非放射性和高效性,尤其适合哺乳细胞研究。Promega的pGL3载体提供了分析转录活性...
载体构建中
常用的
选择标记基因和
报告基因
是什么?
答:
报告基因的主要作用是标记转化细胞,起报告和识别作用。
常用的有Gus基因(β-葡萄糖苷酸酶基因)
,该基因来自大肠杆菌染色体上的uidA座位,编码β-葡萄糖苷酸酶。绝大多数植物不存在内源的Gus基因活性,因而Gus基因被广泛用作转基因植物的报告基因。常用的检测方法有组织化学染色定位法、荧光检测法和分光光...
什么是
报告基因
检测法?
答:
转基因植物常用的报告基因主要有β-葡萄糖醛酸乙酰转移酶(β-glucuronidase)基因emphasis
:role=italicgusemphasis、胭脂碱合成酶(nopaline:synthase)基因emphasis:role=italicnosemphasis、章鱼碱合成酶(octopine:synthase)基因emphasis:role=italicocsemphasis、
荧光素酶
(luciferase)基因emphasis:role=...
常用的
标记
基因
有哪些
答:
卡那霉素基因.抗新潮霉素基因 抗草甘膦基因 GUS
报告基因
5绿色荧光蛋白基因GFP
什么是报道
基因
答:
地球生物包括动物、植物、微生物,数量巨大,种类繁多,形态各异,生存环境和生活习性各不相同,这都是由
基因
控制的。“种瓜得瓜、种豆得豆”是人们对这种现象的高度概括,即物种的生物学特征和特性是由基因决定的,是可以遗传的。一个基因编码一个蛋白质,蛋白质的功能决定生物体所表现出来的特征特性。
标记
基因
的分类及作用
答:
理想的报告基因通常具备如下基本要求:①、受体细胞中不存在相应内源等位基因的活性;②、它的产物是唯一的,且不会损害受体细胞;③、具有快速、廉价、灵敏、定量和可重复性的检测特性。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因(cat)
、荧光素酶基因
(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)等。
基因
工程中标记基因的作用
答:
理想的报告基因通常具备如下基本要求:①、受体细胞中不存在相应内源等位基因的活性;②、它的产物是唯一的,且不会损害受体细胞;③、具有快速、廉价、灵敏、定量和可重复性的检测特性。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因(cat)
、荧光素酶基因
(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)等。
荧光素酶报告基因
检测
答:
常用
荧光素酶
报告基因载体:1、pRL-TK这个载体是由Promega开发的,pRL-TK是海肾荧光素酶报告载体,含有SV40增强子,质粒图谱如下所示:2、pGL3-Basic是萤火虫荧光报告载体,图谱如下图所示:从这两个图谱中可以发现,ppGL3-Basic这个载体主要是用于评估miRNA与靶基因3’UTR的结合,靶基因的3’UTR放在荧光...
怎么获得一个
报告基因
?
答:
报告基因有很多种,
常用的报告基因
种类有:氯霉素转乙酰酶(CAT),β半乳糖苷酶(β-gal),β葡萄糖苷酸酶(β-GUS),分泌型碱性磷酸酶,荧光素酶,荧光蛋白等。一般都是跟公司购买相关质粒,自己构建载体
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