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引物的退火温度
pcr过程中
退火温度
是什么决定的
答:
另一种说法:熔解温度(Tm)是引物的一个重要参数.这是当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.Tm对于设定PCR退火温度是必需的.在理想状态下,退火温度足够低,以保证引物同目的序列有效退火,同时还要足够高,
以减少非特异性结合.合理的退火温度从55℃到70℃.退火温度一般设定比引物的
Tm低5℃...
...
引物
2Tm值是61,用这对引物进行PCR反应
退火温度
应该设定为多少,求...
答:
55°C左右
吧~一般退火温度比Tm值低5度~但要确定一下你的polymerase适用的退火温度~比如pfu一般不要低于60°C~Taq不低于55°C即可~
做pcr,如何确定最佳
退火
及延伸的时间和
温度
?
答:
退火温度根据引物来决定
一般先用55° 不行的话再往下降
同源重组
引物退火温度
答:
合理的退火温度从55℃到70℃
。退火温度一般设定比引物的Tm低5℃。结合可能在模板变性后温度快速冷却至40℃~60℃(某个退火温度)的时候,可使引物和模板发生结合。由于模板DNA比引物复杂得多,引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞,
pcr
退火温度
怎么确定
答:
1.
退火温度
=4×(G+C)+2×(A+T)-(5~8) 只是粗算,有时不灵,但比较简便.2.用primer5(or oligo6)计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认为这个值就是退火温度,我的经验再加2 or 3度最好.3.合成
引物的
单子上也有个Tm,减去5~8也可,但有些公司提供的Tm就是方法1计算的....
引物
tm值低于50,怎么设置pcr
退火温度
答:
在设置退火温度:1、低于估算的Tm5℃作为起始
的退火温度
,以2℃为增量,逐步提高退火温度。2、较高的退火温度会减少
引物
二聚体和非特异性产物的形成。3、为获得最佳结果,两个引物应具有近似的Tm值。4、如果两个引物Tm不同,将退火温度设定为比最低的Tm低5℃。5、为了提高特异性,可以在根据较高Tm...
pcr
退火温度
降至
引物
tm值左右
答:
降至Tm值5℃。根据查询pcr相关信息得知,pcr
退火温度
降至Tm值5℃。、退火温度低于引物Tm值5℃,普遍在45~55℃。退火温度需要从多方面去决定,根据
引物的
Tm值(Tm值=4(G+C)+2(A+T))为参考,根据扩增的长度适当下调作为退火温度。
PCR
退火温度
答:
在理想状态下,退火温度足够低,以保证引物同目的序列有效退火, 同时还要足够高,以减少非特异性结合。
合理的退火温度从55℃到70℃
。退火温度一般设定比引物的 Tm低5℃。详细的还是看看下面这个网站 希望能帮到你 参考资料:http://www.biox.cn/content/20050513/13054.htm ...
pcr
退火温度
一般为多少?
答:
一般
的退火温度
为55℃至60℃,有的资料至70度。退火温度一般设定比
引物的
Tm低5℃,Tm值确定了,退火温度一般也是确定的啦,Tm值(解链温度)=4(G+C)+2(A+T) 。从这个范围来看,上述D E两个选项都是可能的,这道题出的太笼统。参考资料:http://baike.baidu.com/view/274650.htm ...
引物退火温度
答:
Tm指的是把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。我们PCR时候,当然不能用Tm值来作为
退火的
温度。一般来说,
退火温度
比Tm值要低上5度左右。但是这个也不是绝对的。建议你如果说模板比较充足的话,做一个梯度试验。范围在Tm值周围10度左右,如果说在这个范围内可以得到一个明显的结果就可以确定。如果说...
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