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质粒酶切电泳结果讨论
质粒酶切
前后
电泳结果
有什么不同
答:
如果是单
酶切
,超螺旋
质粒
会变成开链DNA,开链的DNA在凝胶中泳动速度慢于超螺旋质粒,因此条带会偏大,这是酶切充分的情况。如果不充分,就会有大小有差距的几条带;如果是双酶切,而且片段大小适中,可以看见酶切的片段和载体,还有未切开的质粒。能不能区分超螺旋质粒和开链质粒,和所用琼脂糖凝...
生物类专业学渣一枚,求学霸解读此题
答:
1、没问题,这是
质粒
构象不同导致在琼脂糖胶中的迁移率不同。2、应该是核DNA。3、同一质粒的话,应该是菌液浓度低所致;不同质粒,可能是菌液浓度不同,或质粒的拷贝数不同。4、一条带,因为将质粒酶切后,只有一种线性的构象,只能跑出一条带。
pUC19
质粒
用EcoRⅠ
酶切
后
电泳结果
分析
答:
pUC19
质粒
在2500bp左右,EcoRⅠ
酶切
位点仅为一个。质粒呈线性时,
电泳
位置大概在2500bp左右,如果质粒提取的好,那提取出来的质粒会是超螺旋。超螺旋在电泳中跑得快,会在2500bp前面,所以看上去会是比较小的条带。而提取过程不好的话,在超螺旋后面会有两条带,一条为开环质粒(2500bp左右),一...
质粒酶切
前后
电泳结果
有什么不同
答:
酶切
前,
质粒电泳
图一般是三条条带,并认为这三条带从上到下一次是线性、开环、超螺旋.其实可能会比这条带更多些,可以认为是中间复合体状态.酶切后,因为超螺旋状态的质粒被切成线性,所以条带会有一条条带.如果是双酶切,或是质粒上的酶切位点比较多的话,会有两条或更多条带.
DNA
酶切
以及
电泳
的
结果
应如何分析
答:
根据marker你可以判断你的条带大小啊!我们这边用的DNA MARKER III 从上到下条带大小分别为4500bp 3000bp 2000bp 1200bp 800bp 500bp 300bp 100bp。然后你 就可以估算出大小了啊。如果你只是单纯的想判断有没有切开的话,你可以拿你未切过的
质粒
与切过的质粒一起跑胶。一般切开的...
如果
质粒
dna双
酶切电泳
后,在胶上出现1)没有条带2)一条3)两条4)三条...
答:
3正常情况下可以显现出大小不等的两条带,双
酶切
将整个环状DNA切成两个片段。4可能其中一个
酶质粒
上有2个酶切位点,或是因为酶切不彻底,部分质粒没有被双酶切(大片段,小片段,和单酶切得出的片段,因片段大小不一呈现出三条带)。5质粒上有多个关于这两个酶的酶切位点,即酶切不专一,从而...
双
酶切质粒
后
电泳
的问题
答:
很显然是
质粒
发生了自连啦。切开的2个质粒连起来了,因此相当于2个质粒的大小。你需采用磷酸化避免自连发生。
质粒
的
酶切
后琼脂糖凝胶
电泳
检测 在紫外光下应该出现几条带?
答:
最好的
酶切结果
当然是只有两条条带,如果旁边再跑一个没有酶切的
质粒
和一个空载(同样的载体但是没有目的片段的质粒)作为对照那会很好说明问题:这两条条带应该是一条很明亮,位置较高(酶切下的线性载体),粗一些,理论上是下面那条比较细的条带(切下的目的片段)的6倍亮度——这个可以根据跑...
DNA
电泳
图
结果
分析
答:
看第三条泳带,说明你的目的条带大约在750bp。再看第四个泳带,靠近点样孔的是你切掉了目的基因的
质粒
,此时为线性的质粒,能够看见它比第二条泳道那条亮带跑的要慢一些,这是对的
结果
。还是因为环状的比线性的跑的快。而第四条泳带下面那个浅带,是你的目的基因,它与你PCR产物大小一样。因此...
质粒酶切
后的
电泳
图常见问题
答:
很显然是
质粒
发生了自连啦.切开的2个质粒连起来了,因此相当于2个质粒的大小.你需采用磷酸化避免自连发生.
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