www问答网
所有问题
当前搜索:
DNA重组过程中的DNA连接方式
DNA
分子
的连接方法
有哪些?
答:
1、平末端法
,有些核酸内切酶切出的DNA分子是平末端,对DNA分子的单链末端亦可用核酸酶S1或DNA聚合酶Ⅰ来修平或补齐,然后用T4 DNA连接酶将不同片段连接起来。该法形成重组DNA分子的效率低,只及粘性末端法的1%。2、
人工接头法
,1976年发展起来的。首先用化学法合成具有某种限制性内切酶识别位点的序列...
DNA重组的DNA重组
技术
连接
反应
答:
外源DNA和质粒载体的连接
外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化,则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口(图...
DNA的连接方式
有哪些
答:
耐热连
耐热连接酶链式反应作者:周翔达,宋晓,怀聪,孙海燕,陈红岩,卢大儒。
重组dna的连接方式
为什么不包括黏端和平端的连接
答:
重组dna的连接方式不包括黏端和平端的连接,由于dna是呈双螺旋式连接
。两种同尾酶酶切的,产生相同的互补黏性末端,可以有效地进行连接,获得的重组DNA分子往往消失了原来用于酶切的那两种限制性内切核酸酶的识别序列。
简述利用
DNA重组
技术在大肠杆菌细胞中克隆外源
基因
的基本
过程
?
答:
利用
DNA重组
技术在大肠杆菌细胞中克隆外源基因的基本
过程
通常包括以下步骤:DNA提取:从源生物体中提取所需的外源DNA片段,可以通过PCR扩增、酶切等
方法
获取特定
的DNA
序列。载体准备:选择适当的载体,常用的是质粒(plasmid)。质粒是环状的DNA分子,可以在细菌细胞中自主复制。将质粒进行线性化处理,通常通过...
DNA的
片段之间有哪些
连接
?
答:
或衔接头(adaptor)。先将连杆连接到待连接的一种或两种DNA片段的末端,然后用合适的限制性内切核酸酶酶切连杆,使待连接的两种DNA片段具互补黏性末端,最后在
DNA连接
酶催化下使两种DNA片段连接,产生
重组DNA
分子。此外,也可以根据两DNA片段的末端,选用合适的衔接头直接把两DNA片段连接在一起。
DNA重组的
平端
DNA连接
答:
1.凝聚剂在反应混合物中加入一些可促进大分子群聚作用并可导致DNA分子凝聚成集体的物质,如聚乙二醇(Pheiffer和Zimmerman,1983;Zimmerman和Pheiffer,1983;ZimmermanT Harrison,1985)或氯化六氨全高钴(Rusche和Howard-Flanders,1985),可以使如何取得适当浓度的平端
DNA的
总是迎刃而解。在
连接
反应中,这些...
基因
的不同黏性末端要怎样
连接
?
答:
一般情况下大多使用Klenow酶补平的
方法
,因为S1核酸酶量如果掌握不好,容易造成双链
DNA的
降解反应;②待
连接
的两种DNA分子都具有3′突出末端。Klenow酶对这种结构没有活性,可以用Tsubscript4subscript:DNA聚合酶将这两种DNA的3′突出末端切除,形成平头末端后再连接,所产生的
重组
分子同样少了4对碱基;③...
常用的目的
基因
与载体
的连接方法
有哪些?
答:
第一种
方法
是,用
DNA连接
酶连接具有互补粘性末端
的DNA
片段;(人教版高中生物选修3中提到的E·coliDNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端;T4DNA连接酶,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。)第二种方法是,用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端...
简述
DNA重组
技术的基本步骤,并列举出三种常用
的基因
载体!
答:
获得 载体 ,提取 目的基因 片段,将目的基因片段
连
到载体上获得
重组DNA
,将重组DNA导入到 宿主细胞 中。常用载体有质粒(一般克隆10bp左右
的DNA
片段)、噬菌体(与质粒相比,噬菌体可以克隆较大的DNA片段,噬菌体M13可以使DNA以单链
形式
被提取出来)、黏粒(可以克隆45bp左右的DNA片段)。另外还有BAC...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
重组DNA的基本构建过程是将
DNA重组的程序
DNA的重组形式
简述DNA重组的技术流程
DNA重组的两种形式
简述dna重组的过程
dna体外重组的过程
dna重组的方式有哪些
简述重组dna技术的基本过程