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如何构件融合表达蛋白
质粒
融合
非融合的区别和联系
答:
形成新的质粒。非
融合
无需外界干预,可以在自然条件下完成。3、相同点:质粒融合和非融合都是基因重组的方法,可以将不同的质粒基因片段组合在一起,形成新的质粒。4、应用:质粒融合和非融合都是分子生物学研究中常用的技术,可以用于
构建表达
载体、制备重组
蛋白
、基因敲除等方面。
如何
验证RNA是否与
蛋白质
发生相互作用
答:
研究RNA与蛋白的相互作用一般用三杂交系技术。三杂交系统的基本原理是将一个已知的RNA结合蛋白与转录因子的DNA结合domain构建第一个融合蛋白,第二种蛋白(待选的RNA结合蛋白)与转录激活结构域
构建融合蛋白
。此外构建和
表达
一杂合RNA,含有二个不同的结合位点。当RNA与二个RNA结合蛋白的结合位点相互作用时可...
什么是包涵体,
怎样
避免包涵体的产生
答:
防止包涵体常用的方法:使用中等强度或弱的启动子,低温培养,有限的诱导,优化培养基条件,进行
融合表达
,与伴侣分子和折叠酶共表达,表达定位于不同的空间,选择突变的菌株或其他的原核表达系统。增加
蛋白质
折叠的添加剂:添加剂 可能的作用机制 甘油 对蛋白质具有优先的水合作用 /增加黏度L-精氨酸两亲...
植物
表达
载体
构建
求助啊,我打算用pBI121的,出现问题了
答:
一般来说
融合蛋白
不影响gus的检测,不过影响不影响目的蛋白功能就不一定了。我个人倒是觉得,如果不做定位的的话,gus检测不是那么重要。可以把gus切下去(选用sacI位点)。pcr在基因组合转录组里面都能检测出来就认为目的基因正确
表达
了。要注意的是如果不融合的话别忘了CDS是要带终止密码子的。如果融合...
p1020载体可以用于原核
表达
吗
答:
yhbdxs:实验思路是这样的,将目的基因连接到含有GFP的
表达
载体上,得到GFP和目的基因的
融合蛋白
,再纯化。我现在还没有选定用哪个载体,请你们帮帮我,太多不清楚的地方了。E.coli:通常在进行原核表达实验时,选择使用pET系列载体居多。但是pET系列载体不带有GFP基因,其上的His Tag标签是专门用于分离...
绿色荧光
蛋白
的蛋白应用
答:
单链抗体(Single-chain variable fragment,ScFv)是研究得较多的一种小分子抗体,其优越性在于可在宿主细胞内大量
表达
,易于基因工程操作,尤其易于
构建
抗体
融合蛋白
。关于绿色荧光
蛋白融合
单链抗体的报道很多,国内也有相关报道,如程虹等报道将抗肝癌单链双功能抗体融合GFP真核表达载体并导人小鼠成纤维细胞NIH3T3表达并获得...
生物化学中细胞定位是啥意思
答:
例如在核内、胞质内或者细胞膜上存在。GFP是绿色荧光蛋白,在扫描共聚集显微镜的激光照射下回发出绿色荧光,从而可以精确地定位
蛋白质
的位置。GFP,实际是给你要研究的物质加上标记,在此相当于报告蛋白的作用。使用GFP必须
构建融合蛋白
载体,并在转染之后有效
表达
。这样,若在荧光显微镜下看到细胞内某一部位...
诱导型启动子的启动子分类介绍
答:
BoriSjuk等用根特异启动 子mas2',GFP和烟草钙网蛋白(calreticulin)基因
构建融合表达
载体,水培转基因烟草结果表明,根细胞不仅能够高效生产GFP,而且可将目的
蛋白质
分泌到液体培养基中。因此利用该启动子与其他有用的能编码蛋白质的基因融合,不仅可大量生产目的蛋白质,且更便于回收产物。2.2 茎特异启动子Trindade等利用...
融合表达
和共表达有什么区别?
答:
共表达,一般是分开的,A和B同时在一个细胞表达,但表达出两个分开的蛋白A和蛋白B.
融合表达
是将A和B的
融合蛋白
,表达产物只有一个蛋白.
DNA与
蛋白质
相互作用的研究方法有哪些
答:
分离纯化
融合蛋白
并与磁珠结合,使之固相化之后,再与
表达
目的蛋白的细胞提取物混合保温适当时间,例如在4℃下保温过夜,使目标蛋白同已经固定在磁珠表面的融合蛋白中的诱饵蛋白充分的结合。离心收集与固定化的融合蛋白(即与磁珠相互结合的融合蛋白)中的诱饵蛋白相结合的目的蛋白,经过煮沸处理使目的蛋白与诱饵蛋白相脱离从而...
棣栭〉
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