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高通量测序的步骤
DNA测序
仪
答:
11.POP 6测序胶 ABI产品。12.模板抑制试剂(TSR) ABI产品。13.10×电泳缓冲液 ABI产品。14.ABI PRISM 310型全自动
DNA测序
仪。15.2400型或9600型PCR仪。16.台式冷冻高速离心机。17.台式高速离心机或袖珍离心机。【操作
步骤
】1.PCR测序反应 (1) 取0.2ml的PCR管,用记号笔编号,将管插在颗粒...
获得了大量的
测序
数据,可以进行哪些研究
答:
随着学科的发展,目前许多研究都涉及高通量数据分析(highthroughputdataanalysis)。比较常见的是测序结果分析,例如RNA-seq、CHIP等等。众所周知,数据分析是
高通量测序
应用于生物研究最关键
的步骤
,分析不好,得到的海量数据无异于一堆垃圾。下面是刚刚接触高通量测序数据分析的同学可能比较关心的几个问题。需...
如何获得基因的全长(包括基因的
DNA
结构和cDNA结构)
答:
DNA测序
主要有两种方法:化学法和酶法 主要
步骤
有:一端标记,碱基特异剪切。特定减机修室,然后进行凝胶电泳 可以查一下:早期的化学法:Maxam Gilbert 化学法 如今多用用四种DDNTP进行末端终止的 sanger 方法
质粒载体的构建
步骤
答:
质粒载体的构建
步骤
介绍如下:载体构建过程: 1、引物设计 2、⽬的⽚段选取:RNA提取、RNA反转录、PCR扩增、PCR产物纯化 3、双酶切 4、连接:T4
DNA
ligase连接或者同源重组连接(新贝⽣物:#B101、#B102) 5、转化 6、菌落PCR 7、
测序
:1)摇菌;2)送样; 3)⽐对...
基因
测序的步骤
是什么?
答:
基因
测序的
方法很多。最早是用sanger测序法,原理是双脱氧链终止法;Sanger法是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,并且在每个碱基后面进行荧光标记,产生以A、T、C、G结束的四组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测,从而获得可见的
DNA
碱基序列。第...
鸟枪法如何
测序
? 越通俗越好
答:
鸟枪法测序适用范围:BAC、Fosmid、cosmid、线粒体
DNA
、叶绿体DNA等。全基因组鸟枪法
测序的
主要
步骤
是:第一,建立高度随机、插入片段大小为1.6kb到4kb左右的基因组文库。克隆数要达到一定数量,即经过两端测序的克隆片段的碱基总数应达到基因组大小的6到10倍。第二,高效、大规模的克隆双向测序。第三,...
PCR-SSCP原理和操作
步骤
答:
其碱基置换的性质必须经过
DNA测序
才能确定。因此PCR-SSCP检测是测序之前突变筛查的常用手段。为了便于观察分析结果,PCR扩增体系中常加入a-32P dNTP标记PCR产物,电泳后放射自显影观察泳动带的位置。目前也常用银染法来染色聚丙烯酰胺凝胶上的DNA泳动带,此方法可避免同位素的污染及对操作者的辐射损伤,但其...
dna
加样缓冲液怎样与pcr产物混合
答:
PCR产物直接
测序
技术现已成为分子生物学和基因组学研究中的一个重要技术,广泛用于基因突变检测、遗传性疾病诊断、单核苷酸多态性研究、基因组重叠序列群等.与传统克隆测序技术相比较,直接对PCR扩增的
DNA
进行测序,省去了耗时的克隆
步骤
,避免了传统的细菌培养,模板提取等重复性操作,可以从少量的原始样品中得到...
请问加减法测定
DNA
序列时是怎么从放射自显影的图谱上读出序列的?
答:
除传统的双脱氧链终止法外,自动化测序实际上已成为当今
DNA
序列分析的主流。此外,新的测序方法亦在不断出现,如上世纪90年代提出的杂交测序法等。 二、双脱氧末端终止法
测序步骤
(一)制备模板 有两种类型的DNA可以作为Sanger法
测序的
模板,即纯化的单链DNA和经热变性或碱变性的双链DNA。 1、单链DNA模板 在一般情...
如果想要探测火星上的生命,并对它进行
DNA测序
,要怎么做?
答:
尽管地球上已经存在许多探测和
测序DNA的
技术,但缩小仪器的规模,使其适合于火星漫游者火星车、在从地球运输过来的过程中存活下来,以及在火星恶劣的环境中进行高保真度测序,是一项独特的挑战,不管现在的测序技术是什么,这都是一大堆
步骤
。自2005年开始开发以来,SETG仪器已经得到了发展和改进。目前该团队...
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