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构建融合蛋白时如何去目的基因的终止子
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第1个回答 2022-12-11
通过点突变。构建融合蛋白的时候去目的基因的终止子准确方法为，通过点突变，并且可以解决一切相关问题。融合蛋白，是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物。
相似回答
亚细胞定位时,
目的基因的蛋白
和GFP
融合
?用去除
终止
密码子吗?
怎么
去除...
答：
亚细胞定位时，GFP蛋白是指示蛋白，你的目的蛋白和GFP蛋白融合到一起，显示荧光的部位便是你目的蛋白定位的部位，所以要保证两个蛋白融合为一条肽链，那么就一定要去掉目的蛋白的终止子，否则使翻译提前终止，不能使它们连接为一条肽链。
去掉的方法就是设计PCR引物的时候引物不要包括终止密码子即可
。融合载...
pEGFPS-N1
载体与目的基因之间有终止密码子怎么
办
答：
pEGFP-N1载体上，排列顺序为启动子，多克隆位点，eGFP，
终止
密码在eGFP之后，
目的基因
插入多克隆位点，其
蛋白
与EGFP
融合
表达。如果你的目的基因上有终止密码子，那么在
构建的时候
（PCR时）将其删除就好。
载体中有启动子和
终止子
,
如何
将
目的基因
中的启动子和终止子去掉?并连接...
答：
把引物设计在启动子和
终止子
之间不就可以了。。
目的基因
表达载体中,目的基因前后的启动子、
终止子
的来源和去向_百度知 ...
答：
1 肯定都来源于载体，如果是细菌表达，表达载体可以在细菌中自主复制；如果是真核表达，那么应该是整个载体插入到染色体中。2 目前来说，
终止子
就是一个密码子，所有生物都通用，无所谓来自哪里，从操作来看，是你设计
目的基因
就加带上的，不是载体中本来就有的。启动子是用的载体中自带的启动子，但...
...的质粒 CDS连到载体上时下游引物需要去掉
终止子
吗?
答：
你是指
终止
密码子吧 如果标签在所要表达
基因
N端，且基因C端没有其它标签，则需加上终止密码子；若基因C端有标签则需去除终止密码子
构建融合蛋白
第二个蛋白起始密码子可以不去掉吗
答：
构建融合蛋白
第二个蛋白起始密码子能不去掉。构建融合蛋白是将第一个蛋白
的终止
密码子删除，再接上带有终止密码子的第二个
蛋白基因
，以实现两个
基因的
共同表达。
关于pET32a载体
构建
后,双酶切鉴定不正确求助
答：
一般来说
融合蛋白
不影响gus的检测，不过影响不影响
目的蛋白
功能就不一定了。我个人倒是觉得，如果不做定位的的话，gus检测不是那么重要。可以把gus切下去（选用sacI位点）。pcr在基因组合转录组里面都能检测出来就认为
目的基因
正确表达了。要注意的是如果不融合的话别忘了CDS是要带
终止
密码子的。如果融合...
融合蛋白的融合蛋白
简介
答：
构建融合蛋白
的基本原则是， 将第一个蛋白
的终止
密码子删除，再接上带有终止密码子的第二个
蛋白基因
，以实现两个基因的共同表达。具体步骤有：1.进行
目的基因的
克隆：根据基因序列互补原则 ，设计合适的引物序列，以cDNA为模板，利用PCR技术扩增不同的目的DNA片段。2.在载体中进行重组：通过限制内切酶将两...
非
融合
质粒能用来研究
蛋白的
定位吗
答：
问题2：
融合时
是不是要把该
基因的终止子
去掉，直接加上荧光
蛋白基因
？问题3：因为蛋白后面加了一段荧光蛋白，会对原有的蛋白表达产生影响吗？这样做胞内定位合适吗？有没有其他更好的方法？问题4：融合PCR过程出现了些问题，两片段融合，而且4条引物都是顶着头儿设计的，所以出现好多杂带，怎么办呢...
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