第1个回答 2019-05-11
血清中提取dna可看看BIOG的操作步骤：1.请自行准备：无水乙醇、15mL离心管。2.取出洗涤液，按以下操作：a) 洗涤液A：31.5mL加入13.5mL无水乙醇；63mL加入27mL无水乙醇。b) 洗涤液B：13.5mL加入31.5mL无水乙醇；27mL加入63mL无水乙醇。c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。3.取15mL离心管，加入1500μL样本，30μLDNA Carrier混合均匀，加入1500μL 裂解液及150μL 消化液，振荡混匀，56℃水浴10 分钟。4.加入6000μL无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。5.将吸附柱放入收集管内，将4590μL上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，5,000 rpm 离心2分钟，弃收集管内废液；6.将吸附柱放回收集管内，将剩余4590μL溶液转移至吸附柱内，重复步骤5。7.将吸附柱放回收集管内，加3750μL 洗涤液A至吸附柱内，5,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。8.将吸附柱放回收集管内，加3750μL 洗涤液B至吸附柱内，5,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。9.将吸附柱放回收集管内，5,000 rpm 离心2 分钟，离去残留的洗涤液。10.取出吸附柱，放入新的15 mL离心管内，加入250-400μL 洗脱液，静置3 分钟，5,000 rpm离心3 分钟，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。如需浓缩核酸，则可继续进行后续步骤。11.于洗脱液中加入800ul无水乙醇，轻轻颠倒混匀，5,000 rpm 离心5分钟，弃上清。12.开盖室温放置5min，待乙醇挥发后，加入30-50ul洗脱液溶解核酸。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。