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western blot内参和marker的区别
如题所述
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第1个回答 2017-10-07
Maker是确定蛋白大致分子量~相当于标尺~内参是为了确定上样量一致~内参条带一致证明上样量一致~才能判断目的蛋白含量的变化~本回答被提问者采纳
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western
及pcr中关于
内参和marker的
问题,期待您的解答
答:
首先要明白,
marker和内参不是一种东西。Marker是用来标定蛋白或者DNA大小的
。内参对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。其作用是校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。...
western
里的
marker
和
内参
都是做什么用的
答:
marker可以估计目的蛋白的相对大小
~内参是衡量上样量是否一致的~只有上样的总蛋白量保持一致~目的蛋白含量变化才有说服力~
western blot
电泳时
内参
上样量怎么确定?
答:
内参
一般是指待测样品中含有的一个表达水平稳定的蛋白质,而不是与待测样品相
区分
的另外一种样品。楼主所说的内参是否与其他的什么概念混淆了?如果给更具体的信息,我可以继续回答。
Marker
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答:
揭秘
Western blot
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marker
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内参和
目的蛋白应在同一张膜上进行检测,以确保定量结果的精确性。这种要求并非毫无依据,而是出于对...
western blot 内参
actin 是43还是45 kda
答:
在
Western Blot
中使用内参其实就是在WB过程中另外用内参对应的抗体检测内参,这样在检测目的产物的同时可以检测
内参的
表达,由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定,借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否完全、...
western blot
的
内参
不一致,急求助
答:
良好的参照体系通常包括分子量
Marker
(用来确定蛋白条带对应的分子量大小)、空白载体对照(如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照)、已知量标准产物的正对照,另外还有
内参
。可是由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做
Western Blot
往往省略参照,导致结果出现问题时无法分析结果,即便有结果也可能影响结果的分析。内参...
western blot
目的蛋白和
内参
分子量差距太大怎么办?
答:
当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下,可以在转膜后预染,根据蛋白质
Marker的
大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分,使内参蛋白与目的蛋白分开。然后两块膜分别
与内参
蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行温育,二抗温育以及显色。
如何确定作
western blot的
蛋白质大小
答:
用蛋白
Marker
做对比分子量大小。用
内参
、对照样品做蛋白表达量相对变化分析。
以actin为
内参
,同种细胞
不同
处理,蛋白会产生变化吗
答:
良好的参照体系通常包括分子量
Marker
(用来确定蛋白条带对应的分子量大小),空白载体对照(如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照),已知量标准产物的正对照;另外还有
内参
。可是由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做
Western Blot
往往省略参照,导致结果出现问题时无法分析结果――即便有结果也可能影响结果的分析。
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