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WB内参差多少才算齐
western
内参
不齐能比较吗
答:
不能比较。
内参
不齐,一般是跑胶时电流或电压太大,或者
是是
样品中参杂着盐离子等其他物质也会造成跑不齐,内参不一样,做内参条带时的曝光量也不一样,所以不同膜之间不能互相比较。
WB
相关技巧--quantity one软件调节
内参
答:
1.跑
WB
有时候不想做PCA定量怎么调节
内参
呢? 解答:有老司机认为凭借经验可以用肉眼看出来差异,可是对于新手来说总不能做个几百次才像他们获得经验吧,这时候定量就是急需的内容了,对不对? 解决方法呢? 一般可以用image J 软件或者quantity one软件进行操作, 原理为 :image J ...
wb内参
不齐数据能用吗
答:
能。根据查询wb官网公开信息得知,
wb内参
不齐数据能用。确认每个样品表达GAPDH的量是否一样,不同细菌可能表达量不一样,造成信号强弱不一样。
wb
实验目的条带就(一定比
内参
细吗
答:
在Western Blotting中使用
内参
其实就
是
在
WB
过程中的另外用内参对应的抗体检测内参,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在各组织和细胞 中的表达相对恒定,借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否 ...
纯干货Western blot (
WB
)条带灰度统计与GraphPad作图
答:
一、 Western blot灰度值计算实操详解</ 1.1 Image J灰度分析</ 首先,打开Image J软件,启动界面如图1所示。选择“File”>“Open”,找到你需要分析的Western blot图片,如
内参
β-ACTIN,如图2所示。将图片转换为8位灰度图,操作路径为“Image”>“Type”,如图3所示。接下来,对背景进行统一处理。...
wb
跑
内参
和目的蛋白区别
答:
很多蛋白的表达是有组织特异性的,例如IL-10R,在视网膜,脾脏和肺腺癌组织中有高表达,其他组织表达含量较低;还有一些蛋白,则需要特定的刺激条件
才会
高表达,这种情况往往在磷酸化蛋白及炎症因子蛋白等中较为常见,如果未做特殊的处理,目的蛋白表达含量很低,无法被
WB
检测出。
内参是
western blot法非常...
WB
灰度值分析
答:
通过观察处理前后条带的深浅判断该处理对基因的表达造成的影响,这种判断
是
存在误差的,这时候就需要对结果条带的灰度值进行计算并做统计分析——目的蛋白的灰度值除以
内参
的灰度值,以校正误差,所得结果代表某样品的目的蛋白相对含量,这样得到的结果才更加准确、更有说服力。· 打开Image J软件,...
wb
同一篇文章可以用一个
内参
吗
答:
在
WB
中使用
内参
其实就
是
在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定,借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。elisa试剂盒只够进行一次电泳转膜实验时,分别检测样品的内参量和...
在
WB
中心肌细胞蛋白应该用什么做
内参
答:
第一种
是
超级简便的标记
内参
使用法,只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体,按照正常操作即可;第二种是普通内参,当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量
相差
不大时,可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测,然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体,重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。第三种,当目的蛋白的分子量...
α-平滑肌肌动蛋白
是多少
KD ;做
WB
时选的
内参
可以用β-action 吗_百度知...
答:
WB
能做出β-actin来是因为膜蛋白提取时把胞质蛋白也提出来了。然而,如果我们试验目的是用药物处理细胞,比较处理前后某种膜蛋白的表达情况,此时用膜蛋白提取试剂盒提取膜蛋白后再用β-actin做
内参
似乎就不妥了,因为你根本不知道药物处理前后混杂了多少的胞质蛋白进来。如果没有胞质蛋白混进去的话,β-...
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3
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