wb跑内参和目的蛋白区别

Question

如题所述

Answer 1

wb跑内参和目的蛋白区别：wb跑内参内参通常是在被检样本中高表达且表达水平相对稳定的蛋白。WB可以对目的蛋白进行半定量分析，判断不同样品中目的蛋白表达含量的多少，就是取决于内参的标定。

WB又称为免疫印迹 (immune blot) ，是根据抗原抗体的特异性结合半定量的检测样品中的某种蛋白的方法。

蛋白质印迹 (Western Blot)，作为检测蛋白表达及半定量的基础实验方法。

很多蛋白的表达是有组织特异性的，例如IL-10R，在视网膜，脾脏和肺腺癌组织中有高表达，其他组织表达含量较低；还有一些蛋白，则需要特定的刺激条件才会高表达，这种情况往往在磷酸化蛋白及炎症因子蛋白等中较为常见，如果未做特殊的处理，目的蛋白表达含量很低，无法被WB检测出。

内参是western blot法非常重要而必须的部分。它保证了目的蛋白表达量的相对多少。内参是指由细胞中管家基因编码的蛋白，其在各组织细胞中的表达相对稳定，因此在测定目的蛋白的相对水平时常用它做对照物。

内参抗体，是WB实验中的重要参考，WB可以对目的蛋白进行半定量分析，判断不同样品中目的蛋白表达含量的多少，就是取决于内参的标定。内参选择在WB实验中是很关键的因素，可不是GAPDH或者β-actin万用的哦。

内参如何选择，最重要的决定因素就是目的蛋白，尤其是目的蛋白的表达位置及预处理条件。