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wb每个孔都要加内参吗
western blot
内参加
到哪个
孔
答:
内参
存在于所有加样的孔道内~因为内参是样品组分之一~区别内参与目的蛋白的是其分子量的差异~
westernblot
内参
加在哪里
答:
westernblot
内参
加在于所有加样的孔道内因为
内参
是样品组分之一~区别内参与目的蛋白的是其分子量的差异~蛋白处理:此步骤是关键,蛋白处理的好否决定结果好坏。取细胞,3000rpm 3min离心,加入含蛋白酶抑制剂(现做现加)的细胞裂解液(本实验室选择RIPA,1×106/L细胞对应100ul),枪尖反复吹吸裂解细...
Western Blot为什么必须要用
内参
答:
在Western Blotting中使用
内参
其实就是在
WB
过程中的另外用内参对应的抗体检测内参,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在
各
组织和细胞 中的表达相对恒定,借助检测
每个
样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否 ...
wb每个孔都
必须
加吗
答:
必须
。16个孔的板子上了12个样,对结果影响不大。但是只上了8个样,那么就会发现只上8个样的胶板和上了12个样的胶板相比,条带会宽很多,wb每个孔都必须加。此外,最好补加带有蛋白的buffer,只加buffer样品条带的扩散还是会很厉害。补上有蛋白的样品,那么样品条带就不会扩散了。
Western Blot为什么必须要用
内参
答:
在Western Blot中使用
内参
其实就是在
WB
过程中,同时用内参对应的抗体检测内参,这样可在检测目的蛋白的同时检测内参的表达.由于内参在
各
组织和细胞中的表达相对恒定,借助检测
每个
样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信.此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否完全、整个...
westernblot
内参
蛋白什么时候加
答:
内参
检测的时候加。在
WB
实验中,除了
需要
进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白抗体孵育、显色等常规步骤以外,还需要极其关键的一步,那就是内参检测,通过内参蛋白的表达量作为参照,校正蛋白定量和上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。
western blot
内参
actin 是43还是45 kda
答:
在Western Blot中使用
内参
其实就是在
WB
过程中另外用内参对应的抗体检测内参,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在
各
组织和细胞中的表达相对恒定,借助检测
每个
样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否完全、...
wb
投稿
内参
只要放一张吗
答:
在WesternBlot中使用
内参
其实就是在
WB
过程中另外用内参对应的抗体检测内参,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在
各
组织和细胞中的表达相对恒定,借助检测
每个
样品内参的量就可以用于校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白...
wb内参
是什么意思
答:
wb内参
是WesternBlotting实验内部参照。wb内参是WesternBlotting实验内部参照。蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即WesternBlot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。内部参照,一般是指由管家基因编码表达的蛋白,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做...
western及pcr中关于
内参
和marker的问题,期待您的解答
答:
在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。其作用是校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。pcr产物检测一般marker就可以了。不用
内参
。western一般全
都要
用。免疫组化检测蛋白偏重于蛋白在细胞及组织中的表达分布,定量较为不精确。所以要根据你实验的目的选择实验方法。
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