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大肠杆菌扩增质粒
质粒
名词解释是什么?
答:
细菌
质粒
是DNA重组技术中常用的载体。载体是指把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。将某种目标基因片段重组到质粒中,构成重组基因或重组体。然后将这种重组体经微生物学的转化技术,转入受体细胞(如
大肠杆菌
)中,使重组体中的目标基因在受体菌中得以繁殖或表达,从而改变寄主...
质粒
导入
大肠杆菌
要用什么处理该菌,以使其处于什么细胞状态,从而吸收D...
答:
将
大肠杆菌
用氯化钙处理,以增大大肠杆菌细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组
质粒
能够进入受体细胞,此时的细胞处于感受态(理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态)。
质粒
在微生物育种中的作用是什么?
答:
4) 拷贝数多,使外源DNA可很快
扩增
;5) 存在抗药性基因等选择性标记,便于含
质粒
克隆的检出和选择。质粒的种类:1) 结合性质粒:例如E.coli的F质粒 决定性别并有转移能力 2) 抗药性质粒(抗各种抗生素,抗重金属等离子):例如R质粒 3) 产细菌素和抗生素质粒:例如Col质粒(
大肠杆菌
素质粒)4)...
基因工程如果把
质粒
中的复制原点切掉的后果
答:
复制原点是DNA复制开始的位点,DNA聚合酶结合的位点,如果切掉的话,
质粒
是无法在
大肠杆菌
中
扩增
的。希望能够帮到你~有问题一起讨论解决哦~
重组
质粒
导入
大肠杆菌
的目的是?
答:
目的是表达目的基因,获得代谢产物等.
为什么
大肠杆菌
菌液可以直接PCR, 不需要先破坏细胞壁么?
答:
通常pcr的模板只需要微量就够了,直接使用
大肠杆菌
pcr,在变性加热等过程中,会有
质粒
释放到pcr体系中,理论上只要有一条质粒释放出来,目的基因就可以克隆出来,所以不需要先破坏细胞壁。
什么是
大肠杆菌质粒
载体?
答:
大肠杆菌质粒
载体是应用最广泛的克隆载体,含有大肠杆菌源质粒的复制起始位点,能够在转化的大肠杆菌中按质粒复制的形式进行复制。pBR322是一种常用的典型质粒载体。pBR322由大肠杆菌源质粒emphasis:role=italicColemphasis:E1衍生的质粒pMB1作为出发质粒构建而成,含有emphasis:role=italicColemphasis:E1复制...
为什么将重组
质粒
转移到
大肠杆菌
中?是因为大肠杆菌分裂速度快吗?分裂...
答:
作为受体菌的条件不仅仅是分裂速度快,还要满足结构简单、含遗传物质较少,以便进行目的基因表达鉴定。基因工程中主要侧重于目的基因产物,而不是目的基因。要想获得大量目的基因,通常采用PCR法。
大肠杆菌
和酵母基因工程中载体
质粒
应该分别具有哪些元素?
答:
先看看
质粒
是什么?质粒是基因工程中最常用的载体。质粒广泛存在于生物细胞中,是一种非必需的细胞器。从分子组成看,有DNA 质粒,也有RNA 质粒;从分子构型看,有线型质粒、也有环状质粒;其表型也多种多样。换句话说,质粒就是一段具有一定意义的核酸分子。这样一看,质粒中有哪些元素就清楚了。不管...
重组
质粒
转化后长不出来
答:
重组
质粒
转化后长不出来原因如下:1、重组质粒转化后感受态存放时间过长导致细菌活力很低。2、重组质粒转化后感受态效率太低质粒没有转进感受态细胞中使
大肠杆菌
在筛选平板上不能生长。3、所转化的重组质粒对大肠杆菌生长有影响造成生长缓慢。4、筛选平板用错了或抗生素加错了都会造成不成功。
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