非结构蛋白3ABC抗体被认为是在免疫动物群体中检测
口蹄疫感染动物的最佳指示器。 建立了一种以区分疫苗免疫动物与康复带毒动物或持续感染动物为目的,检测口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体的
单克隆抗体阻断ELISA (FMDV NSP B-ELISA)。 本方法使用
组氨酸单克隆抗体作为捕获抗体,口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体作为检测抗体,原核表达的组氨酸标签口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC作为抗原。 使用本ELISA检测了大量牛、羊及猪的血清,并用公式(1-样品OD值/
阴性对照OD值)来计算血清阻断率(percentage inhibition, PI),最终确定：PI≥0.46判为阳性,PI<0.46判为阴性。根据此标准检测实验感染牛、羊及猪血清敏感性为90.4%、96.1%及85.4%,检测免疫健康牛、羊及猪血清特异性≥99.2%。通过比较发现本ELISA与Ceditest NS ELISA试剂盒有很高的符合率,对感染动物血清与疫区田间牛血清的阳性检出率均高于同类试剂盒。 本ELISA可以作为田间疫情监测方法,在口蹄疫
灭活疫苗免疫动物群体中使用。