3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖含量优缺点

Question

如题所述

Answer 1

3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖含量优缺点如下：

1、淀粉酶是水解淀粉中的糖苷键的一类酶的总称，按照其水解淀粉的作用方式，可以分成α淀粉酶、β淀粉酶等。α/β是其中最主要的两种，广泛存在于禾谷类的种子中。休眠的种子中只存在β-淀粉酶，萌发的种子中才存在α-淀粉酶。

2、β-淀粉酶不耐热，高温下容易钝化，α-淀粉酶不耐酸，pH3.6以下容易钝化；

3、淀粉酶水解生成的麦芽糖，可以用还原糖的3,5-二硝基水杨酸法测定。麦芽糖是还原性糖，可以将3,5-二硝基水杨酸还原，生成3-氨基-5-硝基水杨酸显色集团，在一定浓度范围内颜色的深浅与还原糖的浓度成正比，利用比色法可以求出麦芽糖的含量。

4、还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计。

5、在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

扩展资料：

注意事项：

比色仪器分光光度计应定期检定，应选择正确的波长，合适光程的比色皿。色皿应保持干净，受污染的比色皿可用稀硝酸浸洗，用镜头纸擦拭表面，比色皿内液体不能有气泡或悬浮物。通常情况下，比色测定在室温进行。

显色温度与时间。显色反应有一定的温度和时间要求，如高碘酸钾氧化比色法分析MnO，应微沸10～15min使显色完全，并冷却至室温下比色。二安替比林甲烷比色法分析TiO。，由于显色反应较慢，显色时间则需较长时间(40min以上)。