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westernbloting电泳胶可以4度过夜吗
如题所述
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推荐答案 2017-05-16
跑westernblot时电泳时的条带呈斜行原因很多
主要可能是电泳凝胶配制时未搅拌均匀,造成条带未能直线跑完
电泳凝胶中混入气泡,造成条带被挤压倾斜
也可能是样品缓冲液有干扰,造成条带迁移率不统一
另外上样量过大,被其他泳道挤压也有可能
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放一夜没问题
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wb
四度过夜
时需要震荡吗
答:
有摇床最好就是摇着过夜了,没有也可以静置于4度冰箱里
。4°C缓慢摇晃孵育过夜,才能充分反应。记_是缓慢,轻柔摇晃。如果实在仪器大,就可以把线拉到冰柜里过夜。WB全称WesternBlot蛋白质印迹。4度拿出后,我一般会在室温下摇床上放置半小时到一小时,然后进行后续的操作。但如果目的蛋白丰度高、抗体...
western blot
原理是什么?
答:
Western blot
结果中背景较高的原因及建议:膜封闭不够—延长封闭的时间;选择更加适合的封闭液。一抗稀释度不适宜—对抗体进行滴度测试,选择最适宜的抗体稀释度。一抗孵育的温度偏高—建议4℃结合
过夜
。膜在实验过程中干过—实验过程中要注意保持膜的湿润。检测时曝光时间过长—减少曝光时间。
western blot
的胶片见光会怎么样
答:
western blot
的胶片见光会被曝光掉,未经使用的胶片一般是深蓝色的 如果是将未经使用的胶片拿到日光之下,经过一段时间,胶片会变成白色的 那就是完全曝光的胶片,就不能再拿来做定影,显影了
western
-
blot
实验步骤
答:
(1)参考一抗的说明书,按照适当比例用
Western
一抗稀释液稀释一抗。(2)用微型台式真空泵吸尽封闭液,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。如果一抗孵育一小时效果 不佳,可以在
4
℃缓慢摇动孵育
过夜
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Western blot
实验最常见的10个问题及解决方案
答:
背景深是在
Western blot
发光检测中最常见的问题,造成背景深的原因很多。第一,封闭的问题,封闭条件一般为5%牛奶或BAS室温封闭2-4h,但最好
4度过夜
;实际上牛奶对于多数抗体来说效果不错,但二抗与牛奶可能有交叉反应,因此洗涤很重要。另外BSA蛋白单一,可降低因牛奶其他成分引起的背景。第二,TBST洗脱...
我配的跑PCR的
胶可以
放
过夜
么,还没有点样跑,只是胶配好了,怎么保存更好...
答:
可以的,放在4℃冰箱,效果怎么样,你不妨试一下。我们实验室一懒人更离谱,懒得制胶,上次跑过的胶,他
凝胶
成像看过后,接着跑,等把里面的DNA跑出去以后,这块胶接着用。但是不提倡这样,毕竟制一块胶也不是什么很复杂的事情
WesternBlot
基本原理及步骤
答:
WesternBlot
基本原理及步骤如下:
Western blot
即蛋白质印迹法(免疫印迹试验),它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是将
电泳
分离后的细胞或组织总蛋白质从
凝胶
转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因...
切
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后
能
放
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第二天回收吗
答:
可以。根据查询百度百科信息显示,分子生物学家通常使用带有DNA条带的琼脂糖凝胶来确定某些事物,琼脂糖凝
胶电泳
跑完割下的含有DNA片段的胶DNA片段
胶能
在
4度
冰箱内保存两到三天是不会降解的,因此切胶后能放4度第二天回收的。
大家正在搜
western blot电泳电压
westernblot电泳原理
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western blot制胶
western电泳电流多少
western blot电压
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western blot转膜
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