Ecor1 和 Nco1双酶切体系的配制

Question

如题，多少微升？选用什么buffer？总体积多少？酶各加多少？
谢谢，Ecor1有2种，1是toyobo公司的，1是fermentas的，Nco1是biolab公司的。你的意思是20ul体系，1ulEcor1 和1ul Nco1.我要同时切pET32a，请问pET32a和DNA 可以同时在一个体系里酶切吗？

Answer 1

你用的是哪个公司的酶？ 不同公司的buffer不一样的。

不过，对于一般的体系，可以选择10微升体系或20微升体系。具体是1/10体积的buffer，酶的总体积控制在1/10以内，比如10微升体系酶量不要超过1微升，20微升体系不要超过2微升。DNA加入1~1.5微克即可。用水补足体积。