10×扩增缓冲液2ul，4种dNTP混合物，各200umol/L 2ul，引物各10～100pmol 0.5ul，模板DNA 0.2ug，Taq DNA聚合酶0.2ul，Mg2+1.5mmol/L 1.5ul，加双或三蒸水至20ul。
PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。
扩展资料：
PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。
DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
参考资料来源：百度百科-PCR
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第1个回答 2010-05-13
10Xbuffer: 2ul;（含镁离子，如不含的话另外加MgCl2到终浓度10-20mM ）
2.5mM dNTP: 0.6ul(我喜欢用的，公司一般都默认推荐用0.2uM，也就是1.6ul，个人感觉太多)
10uM Primer：0.4 ul（这是一对混合在一起的，也可以分开加）
10u/ul Taq ：0.2 ul
Template：菌液1ul（我是跑菌落PCR，要按照你的模板浓度来加，一般质粒5-30ng就足够，genome 要100ng以上）
ddH2O: 15.8ul (补足20ul)
不过第一次做还是建议你按所买酶上的说明书来做，做不出来，还可以找他们，呵呵
2.5mM dNTP: 0.6ul(我喜欢用的，公司一般都默认推荐用0.2uM，也就是1.6ul，个人感觉太多)
10uM Primer：0.4 ul（这是一对混合在一起的，也可以分开加）
10u/ul Taq ：0.2 ul
Template：菌液1ul（我是跑菌落PCR，要按照你的模板浓度来加，一般质粒5-30ng就足够，genome 要100ng以上）
ddH2O: 15.8ul (补足20ul)
不过第一次做还是建议你按所买酶上的说明书来做，做不出来，还可以找他们，呵呵
第2个回答 2010-05-13
10×扩增缓冲液 2ul， 4种dNTP混合物 各200umol/L 2ul， 引物各10～100pmol 0.5ul， 模板DNA 0.1～2ug，Taq DNA聚合酶0.2ul，Mg2+1.5mmol/L 1.5ul，加双或三蒸水至20ul。本回答被提问者采纳
第3个回答 2010-05-17
最好根据Taq酶的说明书做
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