在制备培养基时，通常要考虑以下因素：
(1)
pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长最佳pH值变化很小，但一些正常的
成纤维细胞系以pH=7.4～7.7最 好，转化细胞以pH=7.0～7.4更合适。据报道，
上皮细胞以pH=5.5合适。为确定最佳pH值，最好做一个简单的生长实验或特殊功能分析。
酚红常用作指示剂，pH=7.4呈红色，pH=7.0变橙色，pH=6.5变黄色，而pH=7.6呈红色中略带蓝色，pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观 察有很大的
主观性，因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样，放在与制备培养基相同的瓶子中。
(2)缓冲能力碳酸盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用，因此比其他缓冲系统用得多。在生理pH值条件下的缓冲能力差。
(3)
渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围，一般常用冰点降低或
蒸汽压升高测定。如果自己配培养基，可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误 差。
(4)粘度培养基的粘度主要受血清含量的影响，在多数情况下，对细胞生长没有什么影响。在搅拌条件下，用羧 甲基纤维素增加培养基的粘度，可减轻细胞损害。这对在低血清浓度或无血清下条件下培养细胞显得尤为重要。