A549肺癌细胞培养指南
A549是一种人非小细胞肺癌细胞系，由D.J.Griad通过肺癌组织移植精心构建，其起源自一位58岁的白人男性。这种细胞的独特之处在于它们能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成富含不饱和脂肪酸的卵磷脂，为研究提供了重要的实验模型。
对于A549细胞的培养，以下是关键步骤和注意事项：
细胞基本信息
A549人非小细胞肺癌细胞
名称：A549
性别与年龄：男性，58岁
来源：肺组织
特性：贴壁生长，上皮细胞形态
支原体检测：阴性
传代建议：1:2-1:3
换液频率：每周2-3次
冻存条件：无血清冻存液，液氮保存
规格：1x10^6个细胞/T25瓶或1mL冻存管
倍增时间：约22小时
保藏机构：ATCC
培养条件：37℃，95%空气+5%二氧化碳
细胞复苏与管理
收到细胞：检查瓶身完好，培养液无异常，消毒后观察细胞状态
冻存细胞：立即处理，确保细胞存活率
注意事项：去除封口膜，进行气体交换，遵循细胞说明书
操作指南
复苏步骤
快速解冻，离心去除上清，加入新鲜培养基并吹匀
第二天检查细胞密度并进行适当换液
传代操作
观察细胞密度，用消化液轻轻消化后离心分装
按1:2比例接种至新皿或瓶中培养
冻存步骤
收集细胞，离心后计数并加入冻存液，标记冻存管
储存在-80℃冰箱，24小时后转移至液氮罐
温馨提醒
更换培养基：根据细胞生长状况，常规每2-3天更换
传代时机：细胞密度达80%-90%时进行
冻存注意事项：详细记录细胞数量和位置
通过这些详细的步骤和注意事项，您可以更好地管理和培养A549肺癌细胞，以确保实验的准确性和细胞的健康状态。