第一次检查病毒抗体，确认血清抗体的阳性结果，阳性者必须进行确认实验。
第二次检查病毒抗原，检查p24抗原（在急性感染中，可通过ELISA检测血浆中HIV p24抗原用于早期辅助诊断）。在HIV抗体出现后，p24抗原常转为阴性，但在感染后期，可再现p24抗原。（抗原即病毒致病的东西）所以得进行第三次检查。
第三次检查检查病毒核酸，常采用RT-PCR方法，测定血浆中HIV RNA 的拷贝数（病毒载量），用于监测疾病进展和评价抗病毒治疗效果。PCR方法也可检测感染细胞中的HIV前病毒DNA，用于诊断血清阳转前（HIV抗体转阳）的急性感染。
附：
第一次阳性者，为HIV感染者，是重要传染源。第2、3次之一为阳性者，即为艾滋病患者。
AIDS传播途径：
1）性传播（包括同性恋和异性恋）
2）血液传播（输血、血制品、器官移植、注射等）
3）垂直传播（胎盘、产道传播）此外，母婴间还可通过哺乳进行传播。