为什么切割DNA和质粒要用同一种限制酶啊?不相同的粘性尾端不能结合吗?

如题所述

我先明确的回答楼主,不同粘性末端不能连接,但是连接不一定非要用同种酶的酶切结果。酶切之后,根据酶的性质,产生粘性末端或者平末端。粘性末端就是常见的双链末端序列不一样长的末端,平末端就是你说的“直切”,切后双链末端一样长。粘端连接必须要求粘端的序列相同,否则碱基无法完全配对,也就无法连接。即使如此,如果两个酶是“同尾酶”,即两个酶虽然识别的位点不一样,但是产生的粘性末端相同,那么即使是这两种不同的限制酶切割出来的片段,仍可以连接。如果是平末端,则更没有要求,只要两种酶切出来都是平末端,那么完全可以连接。虽然连接效率要比粘端低很多倍,但是能连接是毫无疑问的。上述两种方法在实验室都会用到。我做分子实验已经6年了,自己用过很多次。如有问题欢迎继续追问。
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第1个回答  2013-05-13
不同的末端碱基对的排列顺序不同,无法碱基互补配对.
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