www问答网
所有问题
western blotting 中内参的作用是什么
希望大家可以讲解的详细些
举报该问题
推荐答案 2012-07-31
嗯,同意楼上的说法,内参一般都是选用细胞内表达稳定,表达量比较高的蛋白,比如一些骨架蛋白。这些蛋白一般认为不会因为实验处理,细胞状态不同而在总蛋白中的含量有大的起伏。
有内参的话,你的目的蛋白的表达的比较才有意义,否则的话,你说某一组的目标蛋白表达升高了,怎么排除你上样上多了的原因。
温馨提示:答案为网友推荐,仅供参考
当前网址:
http://www.wendadaohang.com/zd/nGd44KG4d.html
其他回答
第1个回答 2012-07-31
本人还没开始做western,以下见解纯属理论上的看法,估计错误多多。恳请批判。
内参的作用:控制上样量,使上样量一致,以便目标蛋白具有可比性。上样量一致,一般是总蛋白的上样量一致,测定总蛋白,这是上样量一致的粗调节。但如果人为或其他原因导致上样量有偏差,这时就必须用内参加以控制,这是上样量的微调节。
以上是小弟一点理解,请指正
第2个回答 2012-07-31
做归一化处理用的 因为上样量不可能完全一样
相似回答
Western
Blot
为
什么
必须要用
内参
答:
在WesternBlotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参,
这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达
,由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定,借助检测每个样品内参的量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否完全...
wb
内参是什么
意思
答:
wb
内参是Western
Blotting
实验内部参照。蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。
Western
blotting
实验时使用
内参
可以不用做蛋白浓度测定吗
答:
Western blotting本身也是一种 半定量 的检测方法
,不是特别需要准确的待测蛋白的浓度 而且内参的存在也是为了标定出浓度的标准 所以Western blotting实验时使用内参可以不用做蛋白浓度测定
GAPDH基因是做
什么
的?
答:
1.
内参
即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins),它们在各组织和细胞
中的
表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在
Western
Blotting
实验中,除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白...
以actin为
内参
,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗
答:
所以你需要
内参
。 内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins),它们在各组织和细胞
中的
表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在
Western
Blotting
实验中,除了需要进行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上样电泳、转膜、靶蛋白...
GAPDH和GAPDHS的区别
是什么
?
答:
内参
蛋白,或称为内部参照,是实验中用来校准和标准化的工具,特别是哺乳动物细胞表达研究中。它们由管家基因编码,如GAPDH,其表达水平在不同组织和细胞间保持相对稳定,这使得它们成为观察和量化其他蛋白表达变化的可靠参照。在像
Western
blotting
这样精细的实验中,内参检测不仅是确保实验准确性的必要步骤,...
关于
western
blotting
,请各位高人指教
答:
这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体,并以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。
Western
使用的探针是抗体,它与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术
的作用是
对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物
中
的某些特异蛋白进行鉴别和鉴定。蛋白Marker:预染或...
western
blot
数据怎样分析
答:
将各样品目的蛋白量分别除以其
内参
含量,得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量,再用此数值进行样品间的比较和分析,得到目的蛋白含量在不同样品间的实际变化结果。如果样品量充分,可以先检测内参,观测样品间内参显色条带是否一致,根据差异大小调整各样品的上样量重新进行
Western
Blotting
...
新时代下对于
Western
Blotting
发表文章的新要求(一)
答:
荧光
Western
Blotting
使用荧光基团标记的二抗进行检测,膜上的靶标蛋白浓度与可见荧光信号强度呈线性关系,实现真实可靠的定量分析。荧光染料发射光谱不同,因此在一张印迹膜上可实现多个蛋白检测。这样目标蛋白和
内参
蛋白在同一张膜上,就可以避免数据造假的情况发生,更容易被期刊杂志接收。图1:通过使用四种...
大家正在搜
western内参的作用
western blot内参
northernblotting
westernblot内参不齐
westernblot内参原理
western blot应用
western blot怎么读
western blot 原理
western常用内参
相关问题
Western Blot为什么必须要用内参
Western Blot为什么必须要用内参
western blot等生物学试验中的内参是什么意思
Western Blot为什么必须要用内参
Western Blot为什么必须要用内参
Western Blot为什么必须要用内参
Western Blot为什么必须要用内参
western blot等生物学试验中的内参是什么意思