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DNA重组的程序
说明
DNA重组
技术的基本过程。
答:
(2)将目的基因与合适的载体
DNA
(如质粒)在体外进行
重组
、获得重组体(杂交DNA);(3)将重组体转入合适的生物活细胞,使目的基因复制扩增或转录、翻译表达出目的基因编码的蛋白质;(4)从细胞中分离出基因表达产物或获得一个具有新遗传性状的个体。
DNA重组
技术步骤是什么?
答:
DNA重组
技术步骤如下:一、质粒DNA 提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。二、制备
重组DNA
1. 在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL,至反应混合物总体积为20mL,离心混匀,37℃反应过夜。2. 在...
典型的
DNA重组
实验通常包括哪些步骤
答:
重组DNA技术主要包括四个步骤:
提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达
。1、提取目的基因:获取目的基因主要有两条途径:一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。2、目的基因...
简述
DNA重组
技术的基本步骤,并列举出三种常用的基因载体!
答:
将
重组DNA
导入到 宿主细胞 中。常用载体有质粒(一般克隆10bp左右的DNA片段)、噬菌体(与质粒相比,噬菌体可以克隆较大的DNA片段,噬菌体M13可以使DNA以单链 形式 被提取出来)、黏粒(可以克隆45bp左右的DNA片段)。另外还有BAC即 细菌人工染色体 和YAC即 酵母人工染色体 等。
DNA重组
实验通常包括哪些步骤?
答:
a、提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另一DNA分子上(克隆载体),形成一个新的重组DNA分子。b、将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。c、对那些吸收了
重组DNA的
受体细胞进行筛选和鉴定。d、对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。
重组DNA
技术有哪几个步骤
答:
重组DNA
技术一般包括以下几步:获得目的基因;与克隆载体连接,形成新的重组DNA分子;用重组DNA分子转化受体细胞,并能在受体细胞中复制和遗传;对转化子筛选和鉴定;对获得外源
基因的
细胞或生物体通过培养,获得所需的遗传性状或表达出所需要的产物。在具体工作中选择哪条技术路线主要取决于基因的来源、基因本身...
怎样进行
基因重组
?
答:
一般来说,
基因重组
分为4个步骤。首先,是获得具有目的基因的片段,即DNA片段。这个片段的取得既可用工具酶,也可以用机械方法剪取DNA片段。用化学合成人工基因片段,是另一种比较简便的有效的方法。第二,是把含有目的基因的片段与载体(质粒或病毒)DNA分子重组在一起。第三,是把重组好的DNA分子导入宿主...
简述
DNA重组
技术的基本步骤,并列举出三种常用的基因载体!
答:
将
重组DNA
导入到宿主细胞中。常用载体有质粒(一般克隆10bp左右的DNA片段)、噬菌体(与质粒相比,噬菌体可以克隆较大的DNA片段,噬菌体M13可以使DNA以单链形式被提取出来)、黏粒(可以克隆45bp左右的DNA片段)。另外还有BAC即细菌人工染色体和YAC即酵母人工染色体等。
简述利用
DNA重组
技术在大肠杆菌细胞中克隆外源基因的基本过程?
答:
利用
DNA重组
技术在大肠杆菌细胞中克隆外源基因的基本过程通常包括以下步骤:DNA提取:从源生物体中提取所需的外源DNA片段,可以通过PCR扩增、酶切等方法获取特定的DNA序列。载体准备:选择适当的载体,常用的是质粒(plasmid)。质粒是环状的DNA分子,可以在细菌细胞中自主复制。将质粒进行线性化处理,通常通过...
DNA重组的
种类、同源重组的基本过程、相关的酶及其功能。
答:
这属于分子生物学里面的基本内容吧。同源重组:
重组
酶 同源序列; 位点特异性重组:特异性位点,特异性位点的核酸内切酶; 转座重组:转座元—返座元—转座酶、区域性; 异常重组:不需同源序列和重组酶。 2)配对→切刻→交换(单链从 5 向 3 侵入同源
DNA
中)→分枝迁移→Holiday 拆分→重组 DNA...
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