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提取的rna中有dna
提取RNA
过程中怎样去掉
DNA
残留
答:
一般按试剂盒操作说明进行即可,如果怀疑
有DNA
污染,可用DNArase处理,去掉残留DNA。
分离mRNA过程中,如果
RNA有DNA
污染会有影响吗
答:
会有影响
。因为提取的RNA有DNA污染,那么反转录以后的cDNA也就有基因组DNA污染,这样,扩增cDNA。都会出现杂带或非特异性扩增,对实验结果不好。由一个DNA分子,边解旋,边转录。利用细胞核内部的游离核糖核苷酸合成。合成规则遵循碱基互补配对原则。以上过程叫做转录,在细胞核中完成。接着,mRNA穿过核孔。
提取的RNA里
可能掺杂
DNA吗
答:
主要是看RNA的含量.换而言之,实际上最相关的是你提取的时候的组织的生长状况.一般来说
,如果是分生组织等提取的DNA,会有较大的RNA污染.这时候你做电泳可以明确看到RNA的条带,而且有时候会比DNA带更为明显.如果提取过程中RNA降解了,
怎样除去
RNA中
的基因组
DNA
污染
答:
② 单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致
提取的RNA有DNA
污染。③ 细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106 动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加...
RNA中有DNA
污染是什么原因,CDNA做底物总是能扩出来基因组DNA的产物长 ...
答:
如果提RNA有基因组污染不是用不用剧烈震荡能解决问题的,得把提的RNA用DnaseI消化
。根据我的经验,DNA污染与Trizol的种类和你的材料性质有关,一般提的RNA都要经过DnaseI消化以确保除净DNA。至于RT-PCR的引物你如果不会设就找个师兄师姐代设一下吧,没什么难度,主要注意点你可以上网查查。
提取的RNA有DNA
污染的话,电泳图会是怎么样的?
答:
如果污染基因组
DNA
的话,由于基因组DNA分子量大,电泳特别慢,因此通常会在加样孔周围看到EB强染信号。
怎么检测
RNA里
混有基因组
DNA
答:
这个如果你做反转录的话,只能是用PCR检测了。电泳基本检测不出来。象现在的试剂盒或者TRIZOL提
的RNA
,除质量太差,一般含基因组很少。 如果RT-PCR发现结果不对,可以用那种不含RNA酶的
DNA
酶处理一下。 如果引物能避开的话,有点DNA也没关系。转录组学的研究对象包括mRNA和非编码RNA等。新一代高通量...
rna提取
过程中,蛋白质和
dna
是如何去除的?
答:
在
RNA提取
过程中,蛋白质和
DNA
需要被去除以纯化RNA样品。常见的方法包括以下几种:细胞裂解和蛋白质溶解:细胞裂解液一般包含蛋白酶、盐溶液和洗涤缓冲液等成分,这些成分可以裂解细胞膜并溶解蛋白质。蛋白酶会降解蛋白质,将其转化为氨基酸。蛋白质沉淀:加入盐和酒精等试剂可以使蛋白质凝聚形成沉淀,从而将...
rna提取
过程中,蛋白质和
dna
是如何去除的?
答:
3. 在去除
DNA
的步骤中,会添加DNA消化酶(如RNase-free DNase)来降解DNA。这通常发生在蛋白质沉淀之后,以确保DNA不会干扰后续
的RNA提取
步骤。DNA被酶切成短片段后,可以通过离心将其与RNA分离。4. 最后,通过纯化步骤来获得较纯净的RNA。这可以通过结合RNA结合柱或使用硅胶柱、磁珠等材料来实现。这些...
请问你是如何解决trizol法提
RNA中的DNA
污染?谢谢。
答:
要除
RNA中的DNA
最常用的是DNA酶1,很多公司有买的。但是我们用过发现效果并不好,因为你消化DNA的时候对RNA还是有影响的,所以我不建议这么做。你最好在如何更好的
提取RNA
上做文章,提高RNA的纯度。另外做RT-PCR时有一点DNA的污染其实影响不大,而且往往是难免的,关键是没后面的PCR设计好了,应该是...
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