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双酶切用什么buffer
细胞凋亡检测中用的binding
buffer
究竟是
什么
东西
答:
细胞凋亡检测中用的binding
buffer
究竟是
什么
东西
Buffer
在生化实验中一般是指缓冲液,就是当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲液。 具体用法比如 Loading Buffer:上样缓冲液 Binding Buffer:结合缓冲液 Elution Buffer:洗脱缓冲液顾名思义...
双酶切
时两种酶工作温度不同,
使用
时先加高温还是低温的?谢谢!
答:
没有用过这两种
酶双切
,如果这两个的缓冲液可以共用,那么我认为应该先低温消化,若是先高温的话,那么那个低温的酶就会失活。如果两种酶的缓冲液不一样,最好还是分开来单独消化比较好,只是需要中间抽提一次就好。
...wash solution ,elution
buffer
的作用分别是
什么
?
答:
用binding
buffer
是为了增加洗脱柱对核酸的结合活性;wash solution是洗掉柱子里除核酸物质以外的杂质;而shuelution buffer就是最后把DNA从柱子上洗脱下来
使用
的溶液,一般是pH=8.0的TE,dd水也可以。如果不是马上使用DNA,可以将切下的胶放入离心管中-20度保存,这样可以保存更长时间,而且对DNA影响较...
为
什么
各种
酶
试剂都有属于自己的
buffer
?buffer的作用是什么?
答:
酶
是很容易变性的,即使不便性也只能在很严格的最适环境下才能发挥最大效力。
BUFFER
就是为了防止酶变性同时提供使酶发挥最大效力的各种离子的浓度,使酶活性最大。
蛋白纯化过程中,lysis
buffer
,wash buffer和Elution buffer所含的咪唑的...
答:
lysis
buffer
中加咪唑的目的是与杂蛋白竞争,使那些与填料亲和力弱的杂蛋白不能挂柱;wash buffer中加咪唑是为了洗去大部分已挂柱的杂蛋白(也会洗去少量目的蛋白);elution buffer中加梯度咪唑,而且咪唑浓度渐高,是咪唑和目的蛋白竞争性结合填料,从而把目的蛋白从柱上洗脱。这是我的理解,欢迎继续...
双酶切buffer
量加多了能出结果吗?
答:
这个要看你的
酶
对离子强度的敏感性如何,如果非常敏感,加一倍的量,会使酶的活性下降很多,你应当查一下你的酶在不同的离子强度下的活性,所有的公司都会有数据的,他们至少会提供0, 50,100mmol/L三种离子强度下酶的活性程度,如果发现高一级浓度的那个活性在50%或者以上,就没有问题,但如果低于20...
质粒上有BamHI,SalI 2个酶切位点,可以用BamHI,SalI
双酶切
过夜吗
答:
。。。
酶切
的时间最好看看你所
使用
的酶的说明书,上面会有推荐的用法和使用的时间,这两种酶所使用的缓冲液也要考虑到。当然,一般说明书喜欢吹吹牛皮,你最好问一下同实验室有经验的人员。一般酶切质粒会比较好切,基本都不用过夜酶切,切得时间过长会有星号活性。
buffer
到底有
什么
作用啊?
答:
缓冲寄存器又称
缓冲器
,它分输入缓冲器和输出缓冲器两种。前者的作用是将外设送来的数据暂时存放,以便处理器将它取走;后者的作用是用来暂时存放处理器送往外设的数据。由于缓冲器接在数据总线上,故必须具有三态输出功能。缓冲主要用来完成介质液体或气体波动压力趋向于平稳的容器。
做重组质粒
双酶切
验证,酶切后跑电泳结果条带很模糊是
什么
原因?
答:
可能
酶
过量或者加的质粒体积大带进去杂质产生星号活性。
提取质粒用的5种
buffer
分别有
什么
作用?
答:
提取质粒用的5种
buffer
分别作用:buffer P1:除去RNA。buffer P2:裂解细胞。buffer P3:沉淀DNA。buffer WA、buffer WB:都是洗涤液。TE:溶解DNA。实验原理 提取质粒DNA的方法有很多种,从提取产量上分可分为微量提取、中量提取、大量提取,从
使用
仪器上分可分为一般提取和试剂盒方法提取,从具体操作...
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