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PCR技术,为什么和引物结合时要降低温度?
如题所述
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推荐答案 2016-12-20
引物与模板链结合过程要形成氢键,温度高了会断裂氢键?
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PCR
反应退火
温度
的高低
与什么
因素有关
答:
退火
温度
是影响
PCR
反应特异性的重要因素。
引物与
模板复性所需要的退火温度取决于引物的长度、碱基组成及其浓度。引物长度越短
,引物
中G+C的含量越低,所需的退火温度越低。虽然
降低
退火温度可能增加扩增产量,但引物与模板间的错配现象也会增多,导致非特异性扩增上升。相反,提高退火温度虽然可以提高反应的...
PCR
的原理是
什么,
它有什么用途
答:
PCR的原理是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,
低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度
(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。PCR最有价值的应用领域就是对感染疾病的诊断。理论上,只要样本有一个...
pcr
检测中
温度
突然下降的原因
答:
量子碰撞,使得空气流动加快,温度降低
。当温度突然降低时由于模板分子结构较引物复杂的多,而且反应体系中引物DNA。
PCR
实验原理和操作步骤是
什么?
答:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经
PCR
扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它
与引物结合,
为下轮反应做准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后
,温度降
至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--...
PCR技术
基本原理
答:
温度的魔术师
PCR
的温度控制至关重要,复性阶段是DNA链重新配对的关键。在最适宜的温度下,模板DNA能够精确地
与引物结合,
启动特异性扩增。而适当
降低温度,
引物与模板的结合更为稳定,为扩增提供最佳条件。然而,DNA聚合酶在高温下会失去活性,这时热稳定酶如Taq DNA酶的出现,使得PCR在高温环境中得以持续...
PCR
原理是
什么?
答:
PCR
由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它
与引物结合,
为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后
,温度降
至55℃左右,引物与模板DNA单...
利用pcr技时为什么
加热到90
答:
PCR技术
过程简介 1.将目的基因
与引物,
以及耐高温的DNA聚合酶加入PCR扩增仪中.加热到90~95℃.让目的基因解旋.2.
降温
至55~60℃,让引物与①中的DNA单链
结合
.3.加热至70~75℃,让耐高温的DNA聚合酶工作,大量扩增目的基因.
PCR
反应退火
温度
的高低
与什么
因素有关
答:
退火
温度
是影响
PCR
反应特异性的重要因素。
引物与
模板复性所需要的退火温度取决于引物的长度、碱基组成及其浓度。引物长度越短
,引物
中G+C的含量越低,所需的退火温度越低。虽然
降低
退火温度可能增加扩增产量,但引物与模板间的错配现象也会增多,导致非特异性扩增上升。相反,提高退火温度虽然可以提高反应的特异性,但会引起...
PCR
的原理是
什么?
答:
PCR
的基本原理与DNA的体内复制相类似,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火和延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经高温(95℃左右)加热一定时间后,使其解离成单链,以便它
与引物结合
;②模板DNA与引物的退火(复性):将
温度降
至55℃左右时,引物与模板DNA...
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