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pcr反应延伸的温度
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推荐答案 2023-03-14
70~75℃之间。从pcr反应条件看出,延伸的温度70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合,聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。
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pcr反应延伸的温度
答:
70~75℃之间
。从pcr反应条件看出,延伸的温度70~75℃之间,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合,聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。
PCR的延伸温度
一般在什么范围之内
答:
七十至七十五摄氏度
。反应的延伸温度一般选择在七十至七十五摄氏度之间,常用温度为七十二摄氏度。过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。是指聚合酶链式反应,是扩增的一种方法,实验中很常用。包括高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应。延伸时间应该保证聚合酶可以完成扩增长度。另外一个考量是总延伸时...
pcr延伸温度
一般可选择哪个范围内
答:
70~75℃之间,PCR反应的延伸温度一般选择在70~75℃之间
,常用温度为72℃,过高的延伸温度不利于引物和模板的结合。
PCR反应
中使用TaqDNA聚合酶,
延伸
过程一般要需要
的温度
是( )℃_百度...
答:
大部分耐热性dna聚合酶
在pcr反应
时都有在pcr产物的3'末端添加一个“a”的特性。这一步往往在72℃ 10分钟过程产生,taq酶可以在扩增产物的3末端加上a,因此pcr产物回收纯化后可以和t载体直接连接。
PCR
共分几步?
答:
(25℃-65℃):系统
温度
降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链.3.
延伸
(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′端延伸,合成与模板互补的DNA链.每一循环经过变性、退火和延伸,DNA含量即增加一倍.如图所示:现在有些
PCR
因为扩增区很短,即使Taq酶...
为什么
在PCR反应
过程中,使用三个不同
的温度
变化
答:
第一个一般在94-95度左右,叫做变性,就是通过加热打开双链.第二个
温度
点叫做退火,根据引物的TM算出,一般比TM低5度,有利于引物的结合.第三个温度叫做
延伸
,一般采用72度.是引物结合后DNA聚合酶按照模板合成新的链.一分钟一千个碱基对.如此循环.现在很多
PCR
都采用2部法,由于采用了不同的DNA聚合酶(...
什么是
pcr延伸
答:
包括高温变性、低温退火及适温
延伸
等几步
反应
。标准的
PCR
过程分为三步: 1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA。 2.退火(复性)(25℃-65℃):系统
温度
降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。 3.延伸(68℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活性...
如何确定
pcr反应
中的退火
温度
和延长时间
答:
1、退火
温度
低于引物Tm值5 ℃左右,一般在45~55℃。退火温度需要从多方面去决定,一般根据引物的Tm值(Tm值=4(G+C) +2(A+T))为参考,根据扩增的长度适当下调作为退火温度。然后在此次实验基础上做出预估。退火温度对
PCR的
特异性有较大影响。2、
延伸
时间:1min/kb(10kb内)。引物延伸一般在72...
做
pcr
,如何确定最佳退火及
延伸的
时间和
温度
?
答:
延伸
一般都是72° 时间是根据酶的种类和片段长度决定的 退火
温度
根据引物来决定 一般先用55° 不行的话再往下降
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