10 PCR buffer 怎么配置

如题所述

推荐答案推荐于2017-09-22

10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存）

成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.2％溴酚蓝 20mg
0.2％二甲苯青FF 20mg
200 mmol/L EDTA 4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)
0.1％SDS 100ul 10％ SDS
50％甘油 5ml
补足水 20mg 到10ml

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其他回答

第1个回答 2013-05-03

不同的taq酶buffer也不太一样，要根据你的酶来定，一般的taq酶说明书都会有buffer的配方，无非就是些tris Mg2+之类的离子，还有相应的pH

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10微升pcr体系各药品的比例是多少啊,把你用的说下就行,双蒸水是7.44...答：dNTP mix——1ul dd H2O——补足10uL体系即可双蒸水的pH要求其实不是特别严格，毕竟有buffer调节。

PCR实验方法步骤答：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。10×PCR buffer 5 μl dNTP mix （2mM）4 μl 引物1（10pM）2 μl 引物2（10pM）2 μl Taq酶（2U/μl）1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

PCR体系怎么配答：一般加有mg的buffer的mg都是优化过的，直接使用即可，不用额外加镁离子，用ddH2O补齐体积。如果扩增效果不好就要用不含镁离子的buffer，自己加镁离子来优化体系。

20微升pcr反应体系各种反应物分别应该加多少答：10×扩增缓冲液2ul，4种dNTP混合物，各200umol/L 2ul，引物各10～100pmol 0.5ul，模板DNA 0.2ug，Taq DNA聚合酶0.2ul，Mg2+1.5mmol/L 1.5ul，加双或三蒸水至20ul。PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有...

含溴酚蓝的loading buffer配方跑DNA的要10×的我记得只用溴酚蓝和...答：6×Loading buffer:30mM EDTA 36%(v/v) Glycerol 0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF 0.05%(w/v) Bromophenol Blue 主要用于DNA电泳 10×Loading buffer:30mM EDTA 50%(v/v) Glycerol 0.25%(w/v) Xylene Cyanol FF 0.25%(w/v) Bromophenol Blue 主要用于RNA电泳 ...

10微升PCR产物加多少LB答：你的loading buffer是10×的还是6×的？严格的做法是：1.1uL（10×）或是2uL（6×）

PCR反应体系怎么加答：你买PCR酶（taq/pfu）的时候会附赠buffer，一般是10X，50uL体系加5uL就可以了。引物合成回来是粉末，一般溶解成100uM的储存液，然后稀释成10uM的工作液，50uL体系中0.4uM就是各2uL。模板的话，必须要看你是什么样的DNA了。是质粒？片段？还是cDNA文库？不同的模版加的不一样，模版不一定非要按照...

反转录PCR的操作答：（1）在0.5ml微量离心管中，加入总RNA 1-5μg，补充适量的DEPC H2O使总体积达11μl。在管中加10μM Oligo（dT）12-18 1μl，轻轻混匀、离心。（2）70℃加热10min，立即将微量离心管插入冰浴中至少1min。然后加入下列试剂的混合物：10×PCR buffer 2μl25mM MgCl2 2μl10mM dNTPmix 1μl...

PCR加样顺序是怎样的答：一般在0.2mlPCR微量离心管中配制50微升反应体系。dd water 32微升 10*PCR buffer（不含氯化镁） 5微升氯化镁 3微升 dNTP 4微升 Primer1 2微升 Primer2 2微升模板DNA 1微升 Taq酶 1微升再将离心管置于PCR反应体系中，即可。

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