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双酶切用什么buffer
宝生物公司的内切酶
双酶切
时所用到的缓冲液
用什么
来稀释
答:
宝生物的缓冲液都是10*的,你用的时候如果
酶切
10ul体系,就加1ul缓冲液就行,然后再加上你要切的质粒或DNA片段,加上酶,最后用水补足10ul, 就行了
...I 与Fermentas的BstBI的
双酶切
?如何选择
buffer
?如何进行分步酶切...
答:
怎么是两个不同公司的呢。。。分步
酶切
吧。。。比如先用Takara的体系BamHI 先切一下,我一般过夜酶切,然后酚-氯仿抽一下DNA,然后再用Fermentas的体系 BstBI切过夜。。。
请教高手10*
buffer
,2*buffer,1*buffer是
什么
意思啊?
双酶切
时他们之间...
答:
10*的就是十倍浓度的 比如说你要配50ul体系 那就加5ul的10*
buffer
其他同理
为
什么
BamH I和Sal I
双酶切
要分步酶切,哪个酶先切?
答:
可能和你用的酶有关系吧!我用的是toyobo公司的BamHI和SalI,
双酶切
,没问题。不过双酶切时用的
buffer
需要根据公司给的产品说明来确定,未必就是BamHI或SalI的buffer。
...的pst1 限制性内切酶做
酶切
时, 一般加的
buffer
是bufferO,那buffer...
答:
buffer tango 是fermentas公司的一种较为通用的
酶切
buffer。fermentas的buffer有buffer O、buffer R 、buffer tango 、buffer G、buffer B 5种,依照酶的不同而定。http://www.fermentas.com/catalog/re/index.html 这里可以查到
什么酶
可以
用什么buffer
。
HindIII、XhoI
双酶切
答:
这样且可能不能全部切开,如果只是鉴定的话可以,但要是用于连接就会有大量的假阳性。你可以考虑先用一种
酶切
,回收后换另一种酶切,都是用最适
Buffer
,效果应该会好一些
我想问一下从PCR开始有带胶回收
双酶切
,载体双酶切,胶回收后怎么把载体和...
答:
我们用天根公司的胶回收试剂盒,回收目的基因及载体
双酶切
后的产物用于连接,连接体系如下:一般载体1微升,目的基因8微升左右(没.测OD),用T4DNA连接酶(购于TaKaRa公司)1微升,再加酶缓冲液(2.5微升)和水至总体积25微升,16度过夜后第二天转化感受态细菌。目的基因与载体的摩尔数比一般为3至10...
载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做
双酶切
吗?
答:
...山雨(站内联系TA)这样子不好,酶切的效果好需要一定长度是保护碱基,挨着的位点切不动,分步切的话,
buffer
不一样,效果也非常一般,建议在引物上加酶切位点,这样就不受载体的限制了.cory0931(站内联系TA)on yr re:质粒的两个酶切位点,紧挨着的话,势必会影响
双酶切
效果,原因是:内切酶结合时,...
cutsmart
buffer
的作用
答:
增强酶的稳定性、提高酶反应效率。1、增强酶的稳定性:高浓度的氯化钠和乙酸可以抑制内
切酶
的活性,使酶保持最佳的
酶切
活性。2、提高酶反应效率:高浓度的Tris-HCl和乙酸钠可以提供适宜的pH环境,使内切酶保持最佳的酶切活性。
双酶切
的问题
答:
而造成这种情况,一般都是通用
buffer
没有选好,所以你要看两种内切酶的说明书,选择一种两种酶都具有很好活性的buffer进行
酶切
。实在没有很好的通用buffer,那么你需要延长酶切时间。用单酶切不是不可以,但质粒自连的可能性会很大,这种情况下,你可以用碱性磷酸酶处理后再进行连接,但自连可能性还是有...
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