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双酶切用什么buffer
BamHI NdeI
双酶切用
哪种缓冲液
答:
TaKaRa的酶的话,
用K buffer
。
双酶切
验证常用在哪里
答:
双酶切
验证常用于NE
Buffer
的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性试验。同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer,以保证100%的酶活性。由于内切酶在非最佳缓冲液条件下的切割速率会减缓,因此
使用
时可根据每种...
Xho1和Nde1 50μl
双酶切
反应体系的配制??
答:
如果选用TaKaRa的限制性内切酶那么Buffer应使用
H Buffer
,对于50 μl的酶切体系而言应分别加入1.5 μl的Xho1和Nde1并且加入5 μl的10×H Buffer(使得酶切体系中的Buffer浓度为1×工作浓度),最后加入适量的质粒分子并双蒸水补足反应体积至50 μl。
若DNA需要
使用
两种酶进行
酶切
,应如何进行?
答:
如果能够找到让两种酶同时作用的最佳缓冲液NEBuffer
,那就可以同时双酶切。如果找不到就只能采用分步酶切。分步酶切应从反应要求盐浓度低的酶开始,酶切完毕后再调整盐浓度直至满足第二种酶的要求,然后加入第二种酶完成双酶切反应。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液...
SacI 和BamHI
双酶切 用什么buffer
答:
楼主你用的是哪家公司的酶?NEB的话,BamHI是用buffer2,,3,4 ,酶活性都是100%,SacI是buffer1,4,酶活性是100%。所以
双酶切
的话
用buffer
4 好了。其他公司的酶的话,可以查目录或者网上的资料,看每种酶在不同buffer中的酶活性,然后选双酶切的buffer。
Nhe1和EcoR1做
双酶切
的
用什么buffer
好。。
答:
这个要看是哪个公司买的
酶
,比如我买的是NEB公司的,Nhe1和Ecor1都用共同的
buffer
4,也就是随包送的smart buffer,这两种酶在buffer4里都是100%活性,所以选用这种。
HindIII和EcoRI
双酶切用
NEB哪个缓冲液,还有BamHI 和HindIII双酶切用哪...
答:
推荐的是
buffer
3.1,但是这个buffer这两个
酶
都没带,而且因为在3.1中貌似活性都只有50%左右,所以酶的用量得增加,而且时间得加长。如果实在不行,就分别切好了。网页上表格看得比较清楚(https://www.neb.com/tools-and-resources/interactive-tools/double-digest-finder?enzyme1={2F6573A8-32BE...
Kpnl和BamHI
双酶切
的共用
Buffer
是
什么
?Fermentas公司的酶!
答:
建议BamHI专用
buffer
,加1uL的BamHI,2uL的KpnI。
Xbal和XhoI
双酶切
的共用
Buffer
是
什么
?Fermentas公司的酶!
答:
登录到fermentas的网站上最上方,在tool部分有一个Doubledigest的工具,点击点击进去以后,把你要切的两个
酶
勾上,提交,就会给出相应的
buffer
的建议。We recommend:
Buffer
2X Tango™2-fold excess of XbaI XhoI Incubate at 37°C 而且还可以看到每一种酶在此buffer中的活性,由于XbaI在2XTango...
EcoRI和HpaI
双酶切用
哪种缓冲液?
答:
哪个公司的?如果是NEB(New England Biolabs)的话,我可以很负责的告诉你,用
buffer
4,因为我做过,OK。(可以无视EcoRI的星活性)。如果是其它公司的,你可以发消息告诉我,我再帮你想想。PS 用HpaI切后,连接的时候要时间长一些,推荐室温。
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